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电泳缓冲液、染料与凝胶加样液配置 - 尊龙凯时专业方案

发布时间:2025-04-01   信息来源:柴睿萱

在生物医学实验中,电泳缓冲液的配制至关重要。本篇将介绍常用的电泳缓冲液配方及其制备过程,确保科研人员能够获得最佳的实验结果。

电泳缓冲液、染料与凝胶加样液配置 - 尊龙凯时专业方案

1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

该缓冲液的终浓度为:2mol/L Tris碱、1mol/L 乙酸及100mmol/L EDTA。为了配制1L溶液,需按照以下比例配制各成分:

  • 2mol/L Tris碱:242g
  • 1mol/L 乙酸:571ml 冰乙酸(174mol/L)
  • 100mmol/L EDTA:200ml 0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 去离子水:补足至1L

2. 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

该缓冲液的终浓度为:445mmol/L Tris碱、445mmol/L 硼酸盐及10mmol/L EDTA。制备1L溶液所需成分如下:

  • 445mmol/L Tris碱:54g
  • 445mmol/L 硼酸盐:275g
  • 10mmol/L EDTA:20ml 0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 去离子水:补足至1L

3. 染料制备

在电泳实验中,常用的染料有溴酚蓝和二甲/苯青FF。它们的制备过程如下:

  • 1%溴酚蓝:将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100ml水中,搅拌至完全溶解。
  • 1%二甲/苯青FF:将1g二甲/苯青FF溶解于足量水中,定容至100ml。
  • 10mg/ml溴化乙锭:小心称取1g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100ml水,磁力搅拌直至溶解,用铝箔包裹于4℃贮存。

4. 凝胶上样液配方

根据不同需求,凝胶上样液的配方也有所不同:

6×碱性凝胶上样液

配制10ml溶液需要的成分:

  • 0.3N氢氧化钠:6mmol/L
  • 18%聚蔗糖(400型):加入至10ml
  • 0.15%溴甲/酚绿;0.25%二甲/苯青FF
  • 水:300μl
  • 10N氢氧化钠:120μl
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):18g

6×甘油凝胶上样液

制备10ml溶液所需成分:

  • 0.15%溴酚蓝
  • 0.15%二甲/苯青FF
  • 5mmol/L EDTA
  • 50%甘油
  • 水:15ml
  • 1%溴酚蓝及1%二甲/苯青FF:各15ml
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):3ml;去离子水补足至10ml

5. 结论

合理配制电泳缓冲液及染料是进行生物医学实验的重要步骤。使用尊龙凯时品牌的产品,能有效提高实验的稳定性与可靠性,更好地支持您的研究工作。