在生物医学实验中,电泳缓冲液的配制至关重要。本篇将介绍常用的电泳缓冲液配方及其制备过程,确保科研人员能够获得最佳的实验结果。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
该缓冲液的终浓度为:2mol/L Tris碱、1mol/L 乙酸及100mmol/L EDTA。为了配制1L溶液,需按照以下比例配制各成分:
- 2mol/L Tris碱:242g
- 1mol/L 乙酸:571ml 冰乙酸(174mol/L)
- 100mmol/L EDTA:200ml 0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 去离子水:补足至1L
2. 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
该缓冲液的终浓度为:445mmol/L Tris碱、445mmol/L 硼酸盐及10mmol/L EDTA。制备1L溶液所需成分如下:
- 445mmol/L Tris碱:54g
- 445mmol/L 硼酸盐:275g
- 10mmol/L EDTA:20ml 0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 去离子水:补足至1L
3. 染料制备
在电泳实验中,常用的染料有溴酚蓝和二甲/苯青FF。它们的制备过程如下:
- 1%溴酚蓝:将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100ml水中,搅拌至完全溶解。
- 1%二甲/苯青FF:将1g二甲/苯青FF溶解于足量水中,定容至100ml。
- 10mg/ml溴化乙锭:小心称取1g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100ml水,磁力搅拌直至溶解,用铝箔包裹于4℃贮存。
4. 凝胶上样液配方
根据不同需求,凝胶上样液的配方也有所不同:
6×碱性凝胶上样液
配制10ml溶液需要的成分:
- 0.3N氢氧化钠:6mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型):加入至10ml
- 0.15%溴甲/酚绿;0.25%二甲/苯青FF
- 水:300μl
- 10N氢氧化钠:120μl
- 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):18g
6×甘油凝胶上样液
制备10ml溶液所需成分:
- 0.15%溴酚蓝
- 0.15%二甲/苯青FF
- 5mmol/L EDTA
- 50%甘油
- 水:15ml
- 1%溴酚蓝及1%二甲/苯青FF:各15ml
- 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):3ml;去离子水补足至10ml
5. 结论
合理配制电泳缓冲液及染料是进行生物医学实验的重要步骤。使用尊龙凯时品牌的产品,能有效提高实验的稳定性与可靠性,更好地支持您的研究工作。