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细胞培养:尊龙凯时助力PBMC转化为成熟树突状细胞的6大因子

发布时间:2025-07-16   信息来源:伏晓谦

树突状细胞(dendritic cell,DC)被认为是目前已知的功能最强大的抗原递呈细胞(APC)。一个DC能够激活100到3000个T细胞,这一数字是巨噬细胞和B细胞激活能力的100到1000倍。DC通过有效处理肿瘤抗原并将其呈递给T细胞,显著促进初始T细胞的增殖,而其他类型的APC(如巨噬细胞和B细胞)则仅能刺激已被激活或记忆的T细胞。

细胞培养:尊龙凯时助力PBMC转化为成熟树突状细胞的6大因子

目前,DC的体外培养主要依赖细胞因子的使用,从骨髓、外周血和脐带血的DC前体中进行定向诱导。由于骨髓和脐带血的采集过程相对复杂,外周血因其易于获取和不需要复杂的筛选及纯化过程,成为临床上获取DC的优良选择。

在传统的DC培养流程中,使用的细胞因子包括GM-CSF和IL-4。GM-CSF与IL-4的协同作用促进单核细胞向“巨噬细胞样细胞”的分化,而IL-4则抑制DC前体向CD14+巨噬细胞的转化,使其转为CD14-/CD1a-的不成熟DC(iDC)。此时的iDC具有较强的抗原摄取与加工能力,但其抗原递呈能力仍较低,细胞表面仅中度表达MHCⅠ和Ⅱ类分子及B7家族分子(如CD80和CD86),而不表达或低表达CD14。

引入TNF-α和IL-1β等细胞因子后,TNF-α激活NF-κB信号通路,从而促进DC的成熟(CD1a+/CD83+)。IL-1β与TNF-α的共同作用进一步增强DC的成熟过程,促进MHCⅡ类分子和共刺激分子的表达。同时,IL-6与PGE2也在DC成熟及迁移中发挥重要作用,尤其是DC的迁移能力在此阶段得到了显著提升。成熟DC(mDC)在抗原摄取和加工能力上明显减弱,但其抗原递呈能力却得到了显著增强,能够有效激活T细胞。

在实验室中,通过全血采集和Ficoll梯度离心法,可以从人外周血中获得单个核细胞(PBMC)。接着,采用贴壁法或磁珠法富集CD14+单核细胞。贴壁法中,将2x106个细胞/ml的PBMC铺板培养,在37℃下培养1-2小时以使单核细胞附壁,而摇动培养板将未贴壁的细胞去除。磁珠法则利用CD14+磁珠阳性分选获得高纯度的单核细胞。这一过程还需注意去除悬浮的淋巴细胞。

在培养过程中,经过数天后,细胞将会逐渐转变为未成熟的MoDC,至第8天,成熟的DC细胞悬浮以及细胞体积变大并出现大量刺状突起。通常,流式细胞检测可用来分析DC细胞的成熟状态及其功能特征。这些细胞因子的检测,能够全面反映出人DC在免疫调节方面的功能。

尊龙凯时品牌为DC体外诱导培养提供优质的科研级及GMP级细胞因子,这些因子包括GM-CSF、IL-4、TNF-α、IL-6和IL-1β等,具有高活性、低内毒素及高批间一致性,极大地支持了DC细胞的高效、稳定与合规培养。

基于DC能够激活T淋巴细胞的特点,混合淋巴反应(MLR)可用于评估免疫应答的强度。通过监测T细胞的增殖等反应,能够系统性地分析DC在免疫调节中的作用,进一步推动生物医疗发展的研究。